自贡市疾病预防控制中心卫生检验所细菌室,针对2012年5月份以来各医院陆续发生的新生儿腹泻突发事件进行采样,通过细菌分离、生化鉴定、血清鉴定等传统实验方法对所采集的大便标本进行检验。通过经典的实验方法鉴定出一些为大肠埃希氏菌0128阳性菌株,但仍有些样品特别是环境标本因细菌量太少的的缘故,传统的实验方法达不到其检测下限而无法鉴定。
大肠埃希氏菌是临床上分离率较高的菌株,但如何区分大肠埃希氏菌分离株是非致病菌株还是致病菌株,传统的实验方法费时费力,而且效率很低,这些检测方法造成病情无法及时诊断,从而不能正确估计发病率现状。近几年PCR方法广泛应用于微生物检测和鉴定领域,PCR以其特异度高、灵敏度强、省时省力等优点大大提高了大肠埃希氏菌的检出和鉴定效率。
卫生检验所本着为突发公共卫生事件提供实验室检测技术支撑的目的,利用中国CDC提供的大肠埃希氏菌0128特异引物对采集的18株样品进行PCR扩增,并进行电泳检测。结果显示,通过血清方法鉴定为0128的13株菌株中12株均检测出特异片段,未检测到的一株应再进行血清鉴定。而通过血清方法未鉴定出和无法鉴定0128的5菌株均未检测到特异片段。说明PCR技术在微生物检测方面能够提供科学、快速、准确的结果;同时与传统实验方法相结合,在开展临床初步检测和菌种鉴定方面具有重大的意义,此方法也可以用于其他细菌的检测和鉴定。
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